La Respuesta Inmunitaria Adaptativa

Si los mecanismos de la respuesta inmunitaria innata no son suficientes para eliminar el patógeno, se activa la respuesta inmunitaria adaptativa. Esta respuesta es llevada a cabo por células especializadas: los linfocitos B y linfocitos T.

Componentes Principales

• Linfocitos B: Producen anticuerpos.
• Linfocitos T: Coordinan la respuesta (CD4+), destruyen células infectadas (CD8+) y regulan la respuesta (Treg).

Fases de la Respuesta Adaptativa

1. Reconocimiento del antígeno: Los linfocitos B reconocen el antígeno directamente, mientras que los linfocitos T lo hacen a través de células presentadoras de antígeno (CPA) y el Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH).
2. Presentación del antígeno: Células como las células dendríticas, los macrófagos y los linfocitos B presentan el antígeno (Ag) a través del CMH de clase I o II a los linfocitos T.
3. Activación de los Linfocitos T (Respuesta Celular): Cuando un linfocito T no activado se encuentra con un antígeno presentado por una CPA, este se activa, prolifera y se diferencia en células capaces de reconocer y atacar al patógeno, como los linfocitos T citotóxicos y cooperadores.
4. Activación de los Linfocitos B (Respuesta Humoral): Este proceso, que forma parte de la inmunidad humoral, comienza cuando un linfocito B reconoce un antígeno específico mediante su receptor (BCR) en los órganos linfoides secundarios. Esto conduce a la producción de anticuerpos (IgM, IgG, IgA, IgE, IgD).

Tipos de Linfocitos T

• Linfocitos T citotóxicos (CD8+): Destruyen células infectadas o anómalas. Reconocen antígenos presentados por el CMH de clase I.
• Linfocitos T cooperadores (CD4+): Coordinan la respuesta inmune. Reconocen antígenos presentados por el CMH de clase II en las CPA. Sus funciones incluyen:
  • Activar macrófagos.
  • Estimular a los linfocitos B para producir anticuerpos.
  • Regular la quimiotaxis, el crecimiento y la comunicación celular.
  • Integrar la inmunidad celular y humoral.
• Linfocitos T reguladores (Tregs): Controlan y frenan la respuesta inmune para evitar la autoinmunidad.
• Linfocitos T de memoria: Mantienen la protección a largo plazo.
• Linfocitos T gamma delta: Proporcionan una defensa especializada, sobre todo frente a virus.

Tipos de Respuesta de Linfocitos B

• Respuesta independiente de linfocitos T.
• Respuesta dependiente de linfocitos T.

Conceptos Clave en Inmunología

Vocabulario

• Antígeno (Ag): Sustancia extraña que induce una respuesta inmunitaria.
• Epítopo: Fragmento del antígeno que es reconocido por el anticuerpo.
• Parátopo: Región del anticuerpo que se une al epítopo.

Estructura del Anticuerpo

• Región Fab: Se encarga de la unión al antígeno.
• Región Fc: Determina la clase del anticuerpo (IgG, IgA, IgM, IgD, IgE) y su función biológica.

Tipos de Inmunoensayos

Clasificación según la Representación de Resultados

• Cuantitativos: Proporcionan un valor exacto (p. ej., ELISA).
• Semicuantitativos: Ofrecen un valor dentro de una escala (p. ej., Western blot).
• Cualitativos: Solo indican presencia o ausencia (p. ej., test de embarazo, inmunocromatografía).

Clasificación según el Diseño del Ensayo

• Competitivo: Miden un antígeno comparando la unión de un antígeno marcado y otro no marcado a una cantidad limitada de anticuerpos.
• No competitivo (tipo sándwich o indirecto): Utilizan dos anticuerpos distintos: uno que captura el antígeno y otro marcado que se une al mismo antígeno.
• Homogéneo: Permiten medir directamente sin separar el antígeno libre del que está unido (no requieren lavados ni separación). Ejemplo: EMIT.
• Heterogéneo: Requieren separar el antígeno libre del marcado antes de medir. Son más específicos y necesitan lavados. Ejemplos: ELISA, RIA en fase sólida.

Técnica ELISA (Ensayo por Inmunoabsorción Ligado a Enzimas)

Es un inmunoensayo heterogéneo que utiliza una enzima unida a un anticuerpo o antígeno para detectar y/o cuantificar moléculas biológicas.

Protocolo General

1. Tapizado: Fijación del antígeno (Ag) o anticuerpo (Ac) a la placa.
2. Bloqueo: Se evita que se produzcan uniones inespecíficas.
3. Adición de la muestra: Se permite que el analito (Ag o Ac) se una a lo que está inmovilizado en la placa.
4. Formación de inmunocomplejos: (No ocurre en todos los tipos de ELISA).
5. Lavados: Se elimina el material no unido para disminuir el ruido de fondo.
6. Adición del conjugado enzimático: Se incorpora el anticuerpo o antígeno marcado con una enzima que producirá la señal.
7. Lavados: Se elimina el conjugado libre que podría generar color no específico.
8. Adición del sustrato (cromogénico): Se permite que la enzima genere un compuesto coloreado detectable.
9. Lectura de la señal: Se mide la absorbancia generada por el sustrato.

Características Principales

• Alta sensibilidad y especificidad.
• Es un ensayo heterogéneo.
• Versátil: Se puede adaptar para detectar:
  • Anticuerpos (ELISA directo, indirecto).
  • Antígenos (sándwich DAS o HADAS).
  • Moléculas en baja concentración (competitivo).
• Puede ser cuantitativo, semicuantitativo o cualitativo.
• Reproducible y estandarizable.
• Relativamente rápido (1-3 horas).
• Fácil de automatizar.

La Sangre: Composición y Funciones

Propiedades Físico-Químicas

• pH: 7,4 (debe mantenerse constante).
• Densidad: 1,05–1,06.
• Viscosidad: 4–6 veces la del agua.
• Osmolaridad: 280–300 mOsm/kg (principalmente por Na⁺ y glucosa).

Funciones

• Transporte: Respiratorio, nutritivo, excretor (urea) y hormonal.
• Hemostasia: Detención de hemorragias.
• Inmunitaria: Defensa del organismo.
• Regulación / Homeostasis:
  • Control del pH (sistemas tampón y acción de pulmones y riñones).
  • Termorregulación.
  • Mantenimiento del volumen intersticial.
  • Distribución y acción hormonal.

Componentes Sanguíneos

Fracción Líquida: Plasma (~55%)

Composición:

• Agua (91%).
• Proteínas (8%): albúmina, globulinas, fibrinógeno, factores de coagulación.
• Nutrientes, electrolitos, desechos metabólicos y gases.

Diferencia entre Plasma y Suero

• Plasma: Se obtiene de sangre tratada con anticoagulante. Contiene fibrinógeno y factores de coagulación.
• Suero: Se obtiene de sangre sin anticoagulante, después de que se ha coagulado. Carece de fibrinógeno y factores de coagulación.

Hematopoyesis

La hematopoyesis es el proceso de formación, proliferación, diferenciación y maduración de todas las células sanguíneas a partir de una célula madre hematopoyética (HSC) pluripotente.

Técnicas de Tinción en el Laboratorio

Tinción de May-Grünwald-Giemsa (MGG)

Objetivo: Diferenciar cualitativa y cuantitativamente todos los elementos formes de la sangre periférica o la médula ósea.

Protocolo

1. Fijación: Se realiza con metanol.
2. Tinción con May-Grünwald.
3. Viraje (fase crítica): Se añade agua tamponada, lo que provoca el viraje que permite la fijación selectiva del colorante según las afinidades celulares.
4. Lavado.
5. Tinción con Giemsa (15 minutos).
6. Lavado final y secado al aire en posición vertical.

Tinción de Wright

Composición:

• Eosina Y.
• Azul de metileno.
• Azures (productos oxidativos).
• Disueltos en alcohol metílico.

Es menos estable y proporciona una coloración más suave que la tinción MGG.

Cuadro Comparativo de Tinciones