Cultivo de Artemia, Anfípodos, Misidos, Copépodos y Daphnia: Guía Completa

Cultivo de Artemia

Generalidades

• Clasificación Sistemática: La clasificación sistemática de la Artemia hasta el nivel de género fue dada por Flossner.

  • Clase: Crustacea
  • Subclase: Branchiopoda
  • Super Orden: Anostraca
  • Familia: Artemiidae
  • Género: Artemia

Artemia salina: originalmente descrita como única especie dentro del género Artemia.

Tiene 6 especies hermanas:

  • Artemia salina: lymigton Inglaterra (extinta)
  • Artemia tunisiana: Europa
  • Artemia franciscana: América del Norte, Central y Sur
  • Artemia persimilis: Argentina
  • Artemia urmiana: Irán
  • Artemia monica: Lago Mono, California.

Distribución:

  • Se distribuye en los 5 continentes con 400 sitios.
  • Dispersión natural en base a la migración de pájaros flamencos.

Introducción por el Hombre:

  • 1era Trasplante: por creencia en capacidad productora de sal (Australia).
  • 2da Aquacultura – BioIndustria: fueron instalados en nuevos sitios (Ej. Llanuras de sal del Noroeste de Brasil).
  • 3er Lugar: Intentos por mejorar el control de la producción de Artemia inoculando biotopos hechos por el hombre en lugares adecuados (Ej. Tanques al Sureste de Asia).

Endemismo en Artemias: Es un término habitual ya que muchas especies habitan zonas muy restringidas y concretas del mundo.

  • Artemia monica vive en el lago monica.
  • Artemia tunisiana único lugar no descrito es la Antártida.
  • Artemia franciscana descrito por todo el mundo.

Estrategias de Supervivencia:

  • Fácilmente depredado por peces, crustáceos o insectos.
  • Posee sistema de osmorregulador eficiente el cual cumple función de:
    • Sintetizar eficazmente pigmentos respiratorios, con el cual enfrentan bajas concentraciones de oxígeno en ambientes hipersalinos.
    • Capacidad de producir quistes en fase de latencia.
  • Se encuentra a los 70 ppt muere a los 260 ppt.

Hábitat:

  • Manglares, charcos y lagos salobres.
  • En cultivo se alimentan de fitoplancton en especial de algas del género Chlamydomonas, Tetraedron y Dunaliella.
  • En la naturaleza se alimentan filtrando materia particulado de origen biológico.
  • Se desarrolla en monocultivos, densidades controladas por limitación del alimento.
  • Presentan cuerpo alargado, segmentado. Tamaño entre 10–12 mm hasta 18 mm. Color rojizo desde pardo rojizo hasta rojo intenso.

Anatomía:

  • Cabeza: 5 segmentos, ojo naupliar, pedúnculos oculares.
  • Tórax: 11 segmentos, cada uno presenta apéndices foliáceos denominados toracopodos donde se distinguen 2 tipos de formaciones:
    • Exopoditos: actúan como branquias y órganos excretores.
    • Endopoditos: función natatoria, función alimenticia.
  • Abdomen: 8 segmentos desprovistos de apéndices, los dos más cercanos al tórax son los genitales.
  • Anatomía interna:
    • Sistema circulatorio: sistema abierto, compuesto por largo corazón y seno repartidos por todo el cuerpo, circula hemolinfa.
    • Sistema respiratorio: función radica en los exopoditos, tiene la cutícula más fina, en su interior presenta cavidades por las que circula hemolinfa actuando a modo de branquias.
    • Sistema digestivo.
    • Sistema nervioso: rudimentario formado por cerebro, se une a una cadena de ganglios que recorre todo el cuerpo, existen dos ganglios por segmento, posee un ganglio anterior al cerebro que recibe los nervios provenientes de los ojos y diversas zonas sensoriales.
    • Sistema de regulación de sales y regulación osmótica: se localiza en los exopoditos, función excretar sales.
    • Órgano del cuello o glándula de la sal: exopodtos intervienen en la regulación de la pared intestinal, intercambia agua con el medio.
    • Sistema reproductor:
      • Hembra: 2 ovarios sitados a ambos lados del tubo digestivo, continúan con dos oviductos que desembocan en el útero o saco ovigero.
      • Macho: 2 testículos alargados que se continúan con 2 vesículas seminales y se comunican al exterior con mediante el vaso deferente. Pene retráctil.

Nauplios de Artemia:

  • 400–450 μ. Color rojizo.
  • Presencia de carotenos y reservas vitelinicas. 3 pares de apéndices:
    • Antenas: Función locomotora.
    • Anténulas: Sensoriales.
    • Mandíbulas:
  • Ojo naupliar débilmente pigmentado. Carece de apéndices torácicos.
  • Tubo digestivo no está totalmente formado (Se alimenta de sus reservas vitelinicas). Al final de este estado larvario comienza la alimentación exotrofica del exterior.

Metanauplio de Artemias:

  • Miden entre 650–700 μ.
  • Tubo digestivo formado. El cuerpo se ha alargado en la zona abdominal. Tórax comienza a segmentarse. El ojo naupliar está más pigmentado.
  • El metanauplio sigue creciendo y pasa por otros estados larvarios, alcanza de 0,9 a 1 mm y presenta los 3 segmentos torácicos más desarrollados.

Reproducción:

  • Presentan reproducción sexual y partenogenética, comienza en el interior de la hembra.
  • Del interior de la hembra se siguen dos caminos:
    • Ovovivíparo: El huevo se desarrolla íntegramente en el interior del útero de la madre. La artemia nace directamente en forma nauplio.
    • Ovíparo: El huevo se desarrolla en el interior de la madre hasta el estado de gástrula. Aquí se debe el desarrollo y se cubre con una gruesa capa denominada corion, siendo expulsado al medio como huevo cístico o ciste.

Cistos:

  • Los cistos son de un color pardo rojizo, con tamaños entre 200–300 μ. Forma esférica cuando están hidratados. Forma semiesférica deshidratado.
  • Corion: capa dura formado por lipoproteínas impregnadas de quitina y hematina, hermatina determina color de la cascara, de marrón pálido a marrón oscuro. Función del corion es proporcionar protección al embrión contra rupturas mecánicas y radiaciones.
  • Membrana cuticular externa: actúa como barrera de permeabilidad. Protege al embrión de la penetración de moléculas.
  • Cutícula embrionaria: capa transparente y altamente elástica.
  • Temperatura: 6 a 37 °C. Su medio debe tener iones de Na, K, Mg., PH: 8.0 – 10.0, Además de encontrarse a 70 ppt.
  • Sistemas intensivos y extensivos (tanques de concreto, tinas de plástico y estanques rústicos).
  • Tamaño de la presa es de 1.2 – 50 μm y el aporte nutricional es basado en elevados contenidos de proteínas, contiene ácidos grasos, omega 3, nutrientes, beta carotenos y bajos en calcio.

Ventajas:

  • Presenta un elevado contenido de proteínas.
  • Gran eficiencia en la conversión del alimento.
  • Reproducción por medio de quistes los cuales toleran la desecación y pueden ser activados en cualquier momento.

Inconvenientes:

  • Pérdida de flotabilidad de cistos no eclosionados.
  • Proceso de decapsulación conlleva a utilizar sistemas sofisticados.

Criterios de Evaluación de la Eclosión:

  • 1. Porcentaje de eclosión: Este es el número de nauplios producidos por 100 quistes.
  • Este criterio implica ciertas restricciones, ya que no tiene en cuenta las impurezas del material original, tales como quistes vacíos, arena, plumas, cristales de sal, insectos, etc.
  • 2. Eficiencia de eclosión: Este es el número de nauplios producidos por gramo de quistes (los mejores productos dan 300.000 nauplios/g quistes). Este criterio cubre la pureza de la muestra de quistes y la viabilidad de los mismos, sin embargo, no tiene en cuenta la talla (peso) de los nauplios.
  • 3. Biomasa de eclosión: Esta es la biomasa naupliar (mg de peso seco) producida por gramo de quistes (los mejores productos alcanzan valores de 600 mg de nauplios/gramo quistes). La biomasa de eclosión es el mejor criterio para la estimación del valor cuantitativo (desde el punto de vista energético de una muestra de quistes).
  • 4. Tasa de eclosión: Esta es la tasa y sincronía con la que los nauplios eclosionan (los mejores productos comienzan a eclosionar a partir de las 15 horas de incubación en agua de mar a 25°C, alcanzando el 90% de su eclosión máxima en el plazo de las 5 horas siguientes).
  • Porcentaje de eclosión (H%): Número de nauplios que pueden ser producidos a partir de 100 quistes hidratados y conteniendo un embrión; en este criterio no se incluyen impurezas o quistes defectuosos, ej. Cascaras rotas, arena, sal, etc.
  • Tasa de eclosión (HR): Este criterio se refiere al tiempo transcurrido desde que comienza la incubación (hidratación de los quistes) hasta la liberación del nauplio (eclosión). Considerándose los siguientes intervalos de tiempo:
    • T0 = Tiempo de incubación hasta que aparecen los primeros nauplios nadadores.
    • T10 = Tiempo de incubación hasta que aparece el 10% del total de los nauplios eclosionables.
    • T90 = Tiempo de incubación hasta que aparece el 90% del total de los nauplios eclosionables.
    • T5 = T90 — T10; este valor da una idea de la sincronía de la eclosión.

Decapsulación de Quistes:

  • Hidratación: 1 a 2 horas agua dulce a salada hasta 35 ppt.
  • Decapsulación: (Reactivos: Hipoclorito, agua de mar, NaOH).
  • Lavado y desactivación de reactivos: HCl 0,1 N Na2S2O3 0,1%.

Condiciones de Enriquecimiento de Nauplios de Artemia sp:

  • Tanque: con fondo cónico o plano.
  • Medio de enriquecimiento: Enriquecimiento en agua de mar normal filtrada, previamente desinfectada y neutralizada con 5 ppm de hipoclorito de sodio y tio-sulfato de sodio respectivamente.
  • Difusores de aire.
  • Temperatura: 25‐30oC.
  • Densidad: hasta 300 nauplio ml–1.

Desinfección de los Quistes:

  • Procedimiento:
    • Suspender los quistes 50 g/l en una solución de hipoclorito (200 ppm de cloro activo) durante 20 min.
    • Aplicar aireación moderada durante la desinfección.
    • Colectar los quistes en una malla (+/- 120 μ) y enjuagarlos con agua de mar antes de incubarlos en el tanque de eclosión.

Determinación de la Eficiencia de Eclosión:

  • Procedimiento:
    • Fijar las muestras con lugol.
    • Observación y conteo del número de nauplios. Ej. 42.
    • Cálculo de la eficiencia de eclosión (EE).
    • Cantidad de quistes incubados. Ej. N =2 g.
    • Volumen de la eclosión: V=1000 ml.
    • Volumen de la muestra: M= 100 μl = 0,1 ml.
    • — Eficiencia de la eclosión — EE= N*V = 42*1000= 210.000 nauplios/g.quiste.
    • Cálculo del porcentaje de eclosión (E%). Número de nauplios = N= 42. Número de embriones E= 9. Porcentaje de eclosión.
    • E% = N = 42 / 42+9 = 82,3%.
    • N + E

Señale la función de los siguientes órganos de Artemia sp.

  • Antenas primarias en macho: son consideradas abrazaderas musculosas, que servirán para el acto copulativo; además de servir para cortar macroalgas para alimentación.
  • Antenas primarias en hembras: tienen función solo locomotora.
  • Exopoditos: actúan como branquias y órganos excretores de cloruro sódico en el medio.
  • Endopoditos: función natatoria; además el endopodito que esta cerca del tórax tiene función alimenticia.
  • Telepoditos: su función es locomotora.

Glosario:

  • Ovovivíparo: Especie que incuba los huevos intra-corporalmente; pero no establece relación alimentaria madre-hijo durante el desarrollo embrionario del huevo. La artemia nace como nauplios.
  • Ovíparo: animal cuyo desarrollo embrionario se verifica dentro de las cubiertas del huevo fecundado y expulsado por la madre, en estado de gástrula en el caso de artemia.
  • Cisto: también conocidos como los huevecillos de artemia que tiene por nombre quistes; soportan periodos de alta salinidad, niveles bajos de O2 y altos t°.
  • Caroteno: pigmento de naturaleza lipídica de calor amarillo-anaranjado que se encuentra en ciertos vegetales.
  • Anaerobiosis: vida en ausencia del oxígeno libre.

Factores Limitantes de la Reproducción:

Se entiende que el factor limitante de la reproducción de Artemia sp es la salinidad. Ya que se indica que si la especie encuentra a altas salinidades (>140ppt) y condiciones adversas (como altas t°), la reproducción será ovípara por lo que se formarán quistes; esto se explica debido a un fenómeno denominado Criptobiosis, en el cual la gástrula permanece en este estado en periodos de desecación ambiental.

Los animales que se adaptan a ambientes salinos y a cambios bruscos de temperatura se denominan euritermos, ejemplo de ellos son la carpa plateada, los bagres, la dorada, etc.

Cultivo de Anfípodos:

  • Características: Son crustáceos que viven en el borde bajo de las costas marinas y de agua dulce. Son detritívoros, se alimentan de partículas orgánicas. La especie más cultivada es Hyalella azteca.
  • Se han observado densidades 10.000/M2 en algunos hábitat.
  • Son alimento de aves, peces e invertebrados.
  • Tiene una alta utilidad para analizar la toxicidad del sedimento.
  • Tienen reproducción sexual y dimorfismo sexual.
  • Temperaturas: sobre 10oC – pero óptimo= 20-26.
  • Dureza: 100‐200 mg/L.
  • Alcalinidad: 50–70 mg/L.
  • Condiciones ligeramente ácidas (pH 6.8).
  • Se desarrolla en lagos y estuarios con 2‐3 ppt.
  • Puede ser cultivada en agua natural o reconstituida entre 15–30 ppt previa aclimatación.
  • Fotoperiodo: 16:8 (500–1000 lux).
  • Oxígeno: mayor a 80% saturación.
  • Alimentación: Es un organismo bentónico detritívoro, requiere de algas y bacterias que se adhieren a partículas orgánicas menores a 65 μm, también se alimentan de espinaca, algas verdes y levaduras.
  • Sistema de cultivo: Sistema de flujo continuo o recirculado, se deben colocar sustratos para refugios, toleran densidades de 50-80 L en estanques, y de 10-50 en acuarios, la cosecha debe ser mediante filtros de 275 μm y 425 μm.

Cultivo de Misidos:

  • Se reconocen en costas atlánticas y pacíficas.
  • Se encuentran a temperaturas de 25- 27 °C.
  • Salinidad de 20-30 ppt.
  • Oxígeno disuelto sobre los 5mg/l.
  • Nitrato menor a 18mg/l.
  • pH 7,8.
  • Se alimentan de nauplios de artemia, diatomeas. Chaetoceros, Skeletoroma, brachionus plicatilis.
  • Sistema de cultivo puede ser con flujo o recirculado, con agua filtrada a 15 μm, su cosecha se realiza con filtros de malla micrón a 350.
  • Aporte nutricional de proteínas, ácidos grasos, aminoácidos.

Ciclo de Vida:

  • Los misidos se reproducen sexualmente. Existe diferenciación sexual.
  • Hembras se reconocen cuando presentan huevos en su oviducto.
  • Los machos por lo general son más pequeños que las hembras.
  • Las hembras maduran entre 12‐20 días cuando tienen 4 mm de longitud.
  • Tienen apareamiento nocturno.
  • Se desarrolla una bolsa llena de huevos en un tiempo de 15 días (5 mm de longitud).
  • Las hembras siguen creciendo hasta alcanzar 9 mm.
  • Producen 25 nuevos individuos por ciclos de 17‐20 días.
  • Los juveniles son planctónicos por 1‐2 días y existe canibalismo.

Cultivo de Copépodos:

  • Soportan elevadas densidades.
  • Temperaturas de 10- 27°C.
  • Salinidad: (0–18‰).
  • PH: 7.5 – 7.8.
  • El tronco cuenta con 10 segmentos.
  • Los segmentos correspondientes al tórax presentan apéndices, pero los que se encuentran en el abdomen no.
  • Carecen de ojos compuesto y presentan un ojo único naupliar.
  • Cuerpo cilíndrico y caudal birraneo.
  • Se cultivan 3 grupos: Copepodos calanoides; Copepodos harpacticoides y Copepodos ciclopoides.
  • Alimentación: Acepta distintas fuentes de alimentación como la levadura, diversos vegetales, algas unicelulares, carne de choritos.
  • Sistema de cultivo: Sistema de cultivo de flujo abierto o cerrado, utiliza sistemas intensivos (se utiliza sustrato de macro alga para cultivo). Suele realizarse en combinación con rotíferos.
  • Tamaño de la presa, 10 – 100 μm con un aporte nutricional basado en proteínas, aminoácidos esenciales.
  • Ventajas: pueden alcanzar unos niveles de productividad muy elevados, se caracteriza por el acotamiento de grandes extensiones de agua en condiciones semi-naturales, bajo costo para su inversión de infraestructuras y mantenimiento aprovechando condiciones óptimas que existen el medio. El control del medio y de los organismos es nulo o mínimo. Alta fecundidad.
  • Inconvenientes: Volumen no controlado, la producción es baja por unidad de superficie cultivada, se alcanza una producción cuyo límite está dado por la capacidad del medio.

Conclusiones:

  • El cultivo de copépodos es bastante dificultoso.
  • Los Harpacticoideos se adaptan mejor al cultivo.
  • Los copépodos más cultivados son Tisbe y Tigriopus.
  • El cultivo extensivo es el más fácil.
  • El cultivo extensivo se basa en provocar un Bloom fitoplanctónico.
  • Los copépodos pueden recolectarse directamente del mar o lago.

Cultivo de Daphnia:

  • Viven en lagos, charcos temporales, agua de desecho, lagunas artificiales.
  • Temperatura de 15 a 25 °C, con un pH de 7,1-8,0, O2: 3 a 6 mg/l.
  • Medios de cultivo recomendables son medios minerales, medios orgánicos y medios enriquecidos.
  • Tamaño de la presa 1 – 50 μm, y aporte nutricional de carotinoides, aminoácidos, proteínas.

Tisbe holothuriae:

  • Soporta elevadas densidades.
  • Amplio rango de condiciones medioambientales.
  • Elevado potencial reproductivo.
  • Acepta distintas fuentes de alimentación (levaduras, diversos vegetales, algas unicelulares, carne de choritos triturados, etc.).
  • Temperatura: 20–22Oc.
  • Flujo abierto o cerrado.
  • Volúmenes pequeños pueden alcanzar 100 ind./ml.
  • En volúmenes mayores las densidades bajan considerablemente dado a que hay una estrecha relación entre superficie/volumen bastante elevada.

Tigriopus japonicus:

  • El cultivo suele realizarse en combinación con rotíferos.
  • Se han utilizado tanques exteriores de hasta 20 m3.
  • La alimentación se realiza en base a microalgas unicelulares del género Chlorella y levadura.
  • Con las condiciones anteriores se pueden mantener los cultivos hasta por 3 meses.
  • Se han producido en las condiciones anteriores densidades de 160 rotíferos/ml y 200 copépodos/litro.
  • Temperatura 10–27oC.
  • Salinidad de 0 a 18 ppt.
  • Las principales dificultades en sus cultivos están en relación al tipo de sustrato dado que esta es una especie bentónica.