Guía Completa sobre Virus: Características, Estructura, Diagnóstico y Clasificación

Virus: Características, Estructura y Clasificación

VIRUS

CARACTERISTICAS

Son partículas pequeñas (20-300 μm)
Son parásitos intracelulares obligados
Tienen un solo tipo de ácido nucleico (ADN o ARN)
Se multiplican dentro de las células vivas

VIROIDES: son pequeñas partículas de ARN monocatenario que contienen información genética para su propia replicación en el núcleo de la célula.

PRIONES: son proteínas infecciosas de ? Pm no antigénicas.

RETROVIRUS: son virus ARN que tienen transcriptasa inversa (se transcribe el ADN bicatenario a partir de ARN, se sintetiza ARN tomando como molde el ADN provírico).

El virus que incluye solo una parte del genoma y que son partículas defectivas y no pueden replicarse por sí mismas.

PSEUDOVIRIONES: incluyen el genoma de la célula parasitada, no se replican.

El virus no tiene capacidad para generar E (porque no tienen enzimas metabólicas).

El virus utiliza el material de la célula huésped para reproducirse y multiplicarse.

ESTRUCTURA VIRICA

La estructura básica del virus es el VIRION.

El virión está formado por:

ac. nucleico

Es ADN o ARN.

Está en el núcleo o core.

El material genético:

ARN

ribovirus

monocatenarios

excepto reovirus

ADN

desoxirribovirus

bicatenarios

excepto parvovirus y fagos

cápside

es la cubierta proteica

CAPSOMEROS: son subunidades que forman la cápside.

NUCLEOCAPSIDE: está formado por:

GENOMA

es el ácido nucleico

La molécula de ácido nucleico puede ser:

linel, continua o fragmentada
circular, plana o superenrollada

CAPSIDE

La nucleocápside puede estar:

desnudo
envuelto	por peplos

IDENTIFICACION DE LOS AC. NUCLEICOS: ( TINCIÓN DE NARANJA DE ACRIDINA):

VIRUS ARN (monocatenarios)	ROJOS
VIRUS ADN (bicatenarios)	AMARILLOS

MORFOLOGIA VIRUS

Según la cápside:

helicoidales

La cápside es un cilindro hueco y helicoidal.

Es un tubo hueco formado por un filamento de ácido nucleico en espiral.

Está formado por protómeros (que son las unidades que se unen en forma de cinta).

icosaédricos o poliédricos

La cápside tiene múltiples caras (gral/ icosaedro).

Es una estructura compacta de máxima fortaleza.

virus con envuelta

Tiene forma esférica.

virus completos

SIMETRIA MIXTA: tiene simetría cúbica y una cola helicoidal

AISLAMIENTO DE VIRUS

Se produce el aislamiento:

animales vivos
huevos con embrión

CULTIVOS CELULARES O DE TEJIDOS:

PRIMARIOS

Se obtienen a partir de un trozo de tejido se separan de forma individual las células.

Dan lugar a una monocapa.

Tiene una vida corta.

SECUNDARIOS

Se obtienen a partir de cultivos celulares primarios.

Tiene una vida mayor.

LINEAS CELULARES CONTINUAS

Son los más utilizados.

Son células transformadas.

Son mantenidas indefinidamente en cultivo.

Los más importantes: HeLa, KB, Hep2

DIAGNOSTICO DE INFECCIONES VIRALES

Se realiza con microscopio electrónico.

Se hace un cultivo.

Se hace una serología para detectar títulos de Ac (ELISA, IF, AHE).

Las muestras se obtienen a partir de:

secreción nasal
frotis faríngeos
líquidos vesiculares
raspados de piel
orina, heces, LCR, biopsias

EFECTO CITOPATICO

Son aquellos que originan un daño o muerte de la célula hospedadora.

Estos efectos pueden ser:

multiplicación en el interior de la célula
alteración de la permeabilidad de la célula hospedadora
inhibición de la síntesis de ADN o ARN de la célula hospedadora

Se manifiesta como:

cuerpos de inclusión
policariocitos
daño cromosómico

CICLO VIDA DE VIRUS

adsorción a las células diana
penetración	endocitosis
liberación de la partícula viral	transcripción replicación formación de proteínas y ácidos nucleicos
expresión del genoma viral
ensamblaje de las nuevas partículas virales
salida de la célula para infectar a otras

TIPOS DE VIRUS

VIRUS ARN O RIBOVIRUS

son monocatenarios excepto los reovirus

SIMETRIA ICOSAEDRICA

SIN ENVOLTURA

reoviridae (bicatenario)
caliciviridae
picornaviridae

CON ENVOLTURA

flaviviridae
togaviridae
retroviridae

SIMETRIA HELICOIDAL

VIRUS ADN O DESOXIRRIBOVIRUS

son bicatenarios excepto los parvovirus

CICLO VIDA DEL VIRUS

ADHESION	del virus a los receptores de superficie de la célula diana (mediante elementos de fijación como son las hemaglutininas
PENETRACION	por medio de fagocitosis
REPLICACION	para formar ARNm a partir del genoma (ADN o ARN)
RECOMBINACION	es la unión de proteínas y el material genético sintetizado
LIBERACION	destruyendo la pared celular (lisis celular) modificando la membrana celular

CULTIVO DE VIRUS

IDENTIFICACION DE LOS VIRUS

inocular la muestra en diferentes líneas celulares

observar el efecto citopático que el virus produce en estas líneas celulares

PROPIEDADES FISICAS

pH y capacidad tamponadora (con rojo de fenol):

pH óptimo	rojo
pH 7,0	naranja
pH 6,5	amarillo
Ph 7,6	azul-rojo
PH 7,8	púrpura

COMPOSICION M.C

soluciones salinas equilibradas (BSS)

aminoácidos (glutamina)

vitaminas (medio MEM: vit B)

glucosa (fuente de E)

hormonas y factores de crecimiento

suero de ternera (es el + usado)	CF
suero bovino fetal	FCS
suero caballo	HS
suero humano	HuS

M.C DE LOS VIRUS

BME

es el medio basal de Eagle

tiene aminoácidos esenciales

con suero bovino fetal al 10%

en este medio crece:

fibroblastos de ratón
células HeLa

MEM

es el medio mínimo esencial de Eagle

es el medio más utilizado

tiene a.a y suero al 10%

RPMI 1640

crece:

linfoblastos
líneas celulares leucémicas

IMDM

es el medio modificación Iscove del medio DMEM

incluye:

albúmina bovina
transferrina
selenito

cultivo de linfocitos en medio libre de suero

McCOY 5A

para crecimiento de líneas celulares diploides (rata, humanos)

MEDIO 199

se utiliza para:

cultivo de células no diferenciadas
estudio de cromosopatías

ANTIBIOTICOS Y ANTIFUNGICOS

se utilizan como mezclas de:

penicilina + streptomicina	antimicrobiano
penicilina + sterptomicina + fungizona	antimicrobiano y antifúngico
gentamicina	antimicrobiano (alternar con penicilina y streptomicina)
anfotericina B	antifúngico y antilevaduras

CULTIVO DE VIRUS

por inoculación en animales de experimentación

desarrollo sobre huevos embrionados

CULTIVOS CELULARES:

PRIMARIOS

son fragmentos de tejidos

se disgrega tripsina (monocapa)

se hace con:

células de riñón de mono
fibroblastos

se utilizan para 2-3 semanas

tiene varios tipos de células

residen 5-10 subcutáneos

el más utilizado es la célula de riñón embrionario humano (REU)

SECUNDARIOS

se obtienen de un cultivo primario

LINEAS CELULAS DIPLOIDES

constituidas por un solo tipo de células

son fibroblastos de pulmón

se utiliza para:

producción de vacunas
aislamiento viral
sustratos para probar materiales tóxicos

el 75% de células tiene igual cariotipo que la original

son fibroblastos embrionarios

el nº de subcultivos: no ? a 50 pases

LINEAS DE CLAS CONTINUAS

el 75% de células diploides

de tejidos cancerosos

los más importantes: HeLa, VERO, RK-13

CULTIVO DE ORGANOS

LINEAS CELULARES:

se utilizan monocapas celulares adheridas al lecho de un tubo

requiere:

sustratos esenciales
solución amortiguadora
pH adecuado
suero fetal bovino

la monocapa se inocula con una muestra tratada

el virus se descubre por el desarrollo de un efecto celular (EC): de 3-4 días

EFECTO CITOPATICO (Ec)

tipos:

formación de sinticios
formación de vesículas
inclusiones
redondeamiento
desprendimiento de la monocapa

LINEAS

las líneas celulares que más se utilizan son:

Hep-2
HeLa
VERO

DIPLOIDES: las que se utilizan son:

PARA DETECTAR EL CRECIMIENTO VIRICO EN M.C

POR SU ACCION O EFECTO CITOPATICO

a nivel celular

alteraciones nucleares
alteraciones citoplasmáticas
aparición de cuerpos de inclusión
formación de sincitios

a nivel monocapa

retracción celular
despegamiento del tubo
distribución irregular

POR APARICION COMPONENTE DEL VIRUS EN EL M.C

hemaglutininas
Ag fijadores del complemento

POR HEMADSORCION O FIJACION

de eritrocitos en membrana de células infectadas

POR IFD

con Ac específicos

POR INTERFERENCIA

de la acción citopática con otros virus infectantes

POR MICROSCOPIA ELECTRONICA

TOMA DE MUESTRA:

obtención temprana de la muestra
en condiciones de esterilidad
no dejar la muestra a tª ambiente, incubadora, no congelar ni tampoco descongelar
se guardan en nevera 4ºC -8ºC o en hielo de agua hasta que se pueda inocular
si el tº de inoculación es ? de 4 días se congela a -70ºC

CRIOPRESERVANTES:

DMSO (dimetil sulfóxido)
suero/ leche descremada / proteínas / sorbitol
glicerol / sacarosa

CLASIFICACION DE VIRUS ARN

FAMILIA REOVIRIDAE

ROTAVIRUS

produce gastroenteritis en lactantes y niños entre 6-24 semanas
incuba 1-3 días
se detecta en heces (aglutinación con partículas de látex)

FAMILIA CALICIVIRIDAE

HEPATITIS E

FAMILIA PICORNAVIRIDAE

ENTEROVIRUS

produce parálisis, meningitis, miocarditis

HEPATITIS A (tipo 72)

la transmisión es fecal-oral

RHINOVIRUS

causa el resfriado común

F. TOGAVIRIDAE Y F. FLAVIRIDAE

RUBEOLA

causa malformacioneas congénitas

sintomas respiratorios

tb hay erupción eritematosa

en gestantes produce sordera, cataratas, pbs cardiacos

se incuba: 14-21 dias

su diagnóstico:por medios serológicos para detectar Ig G e Ig M ( infección aguda)

los métodos utilizados son:

ELISA
FC
AGLUTINACION CON LATEX

VACUNA TRIPLE VIRICA:a los 15 meses y 9 años

paperas
sarampion
rubeola

HEPATITIS C

transmisión fecal-oral

es crónica

F. RETROVIRIDAE

LENTOVIRUS: VIH ( SIDA)

F. ORTHOMYXOVIRIDAE

F. PARAMYXOVIRIDAE

PARAINFLUENZAE ( VPI)	infección del tracto respiratorio
VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL ( VRS)	produce neumonia
SARAMPION	por via respiratoria la rubeola es una enfermedad aguda y febril en la q aparecen manchas de koplk vacuna triple-virica
PAROTIDITIS	produce paperas incubación: 18-21 dias por transmisión aérea se utilizan métodos serológicos ( para detectar Ig M) puede afectar a testiculos y ovarios

F. ARENAVIRIDAE

VIRUS DE LASSA
VIRUS MACHUPO
VIRUS JUNIN

F. RHABDOVIRIDAE

VIRUS HEPATITIS

ARN

HEPATITIS A

transmisión fecal-oral

no son crónicas

HEPATITIS E

transmisión fecal-oral

no son crónicas

HEPATITIS C

transmisión parenteral

son crónicas

HEPATITIS D

transmisión parenteral

son crónicas

ADN

CLASIFICACION VIRUS ADN

F. PARVOVIRIDAE

F. PAPOVIRIDAE

tiene efecto potencial cancerigeno

causan:

verrugas
papilomas

F. ADENOVIRIDAE

es una patologia del tracto respiratorio y ocular

se da sobre todo en niños ? de 6 años

se aisla cultivos celulares a partir de secrecciones nasofaringeas

F. HEPADNVIRIDAE

F. HERPESVIRIDAE

VIRUS HERPES SIMPLE ( VHS)

producen infecciones latentes

TIPOS:

VHS-1	? cintura
VHS-2	genitales

con la tinción de Wright o Giemsa: las clas se ven grandes y multinucleadas

CITOMEGALOVIRUS ( CMV)

en pacientes inmunodeprimidos

su transmisión es por contacto

se encuentra en saliva, orina, semen, leche materna

al microscopio aparece el ojo de lechuza

VIRUS VERICELA-ZOSTER ( VVZ)

produce la viruela loca o varicela

se da cuando ? la inmunidad

VIRUS EPSTEIN-BARR ( VEB)

produce la mononucleosis infecciosa

está asociado al linfoma de Burkitt

se hace la prueba de Paul Bunnell ( para detectar Ac heterófilos

el virus ataca a los L.B pero no a los L.T

HERPES VIRUS HUMANO 6 ( HHV)

elevación brusca de tª ( 40ºC de 2-4 dias)

en niños de 3 meses- 6 años

ESQUEMA CLASIFICACION VIRUS

ARN

ROTAVIRUS

RUBEOLA
RABIA
VIH ( SIDA)
GRIPE
SARAMPION
PAROTIDITIS

ADN

PARVOVIRUS
VERRUGAS/ PAPILOMAS
HEPATITIS B ( VHB)
HERPES SIMPLE ( VHS)
CITOMEGALOVIRUS ( CMV)
VARICELA-ZOSTER ( VVZ)
EPSTEIN-BARR ( VEB)
VIRUELA

VIRUS VIH ( SIDA)

CARACTERISTICAS

pertenece a la familia retroviridae, subfamilia lentivirus

es ARN ( monocatenario: formado por una sola cadena de ARN)

sintetiza ADN a aprtir de ARN viral por la acción de la transcriptasa inversa

posee: nucleocápside y envoltura

GENES:

estructurales

genes core

transcriptasa inversa

proteinas ( q son Ag:

p24
p17
p15

genes envoltura

glicoproteinas ( gp):

gp120	siente tropismo por el receptor CD4 de los L.T4 ( L.T h o cooperadores)
gp41	facilita la aproximación del virus a la cla diana
gp160

reguladores

para la replicación del virus

tat
rev
nef
tev
vpr

el virus se une a los receptores CD4 de los L.T4

se produce una destrucción de L.T4 ( CD4: L.Th o cooperadores)

hay una pérdida de respuesta inmunitaria tanto clar como humoral

la respuesta inmunitaria frente al virus suele tardar entre 6-8 semanas ( periodo ventana)

al pasar este tº, el ADN se pone en circulación y se integra en el ADN de la cla ( periodo de latencia: 2-8 años)

transmisión vertical: intrauterina

TIPOS:

VIH-1	produce SIDA
VIH-2	produce inmunodeficiencia

GENES PRINCIPALES:

env

codifica glicoproteinas de la envoltura

gag

codifica proteinas del core

p55
p24
p17
p15

pol

codifica enzimas necesarias para la replicación virica

transcriptasa inversa	por medio de este enzima se produce la sintesis de ADN a partir de ARN virico cuando el virus entra en la cla
proteasa
endonucleasa

el CD4 tb expresan: macrófagos, clas glía y clas de langerhans

SEROCONVERSION: de 6 semanas a 6 meses

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

DATOS DE LABORATORIO:

L.Th

trombocitopenia

leucopenia

anemia

hipergammaglobulinemia

? gamma-globulinas

serologia

VIH +

aparecen neoplasias

sarcoma de kaposi
linfoma de clas B

infecciones oportunistas

protozoos

toxoplasma

criptosporidium

isospora

bacterias

micobacterias

treponemas

salmonellas

lagionella

hongos

pneumocystis carinii

criptococcus neoformans

candida albicans

virus

herpes simple

epstein-Barr

citomegalovirus

TECNICAS DE CRIBADO

ELISA ( si es + se confirmar con otras técnicas)

TECNICAS DE CONFIRMACION

IFI
RIPA: radioinmunoprecipitación	el virus se expone a una sustancia marcada se detecta por autorradiografia los inmunoprecipitados q se han formado
WB	se utiliza para diferenciar o distinguir los Ac frente a las diferentes proteinas del virus
CULTIVO
PCR

MARCADORES SEGUIMIENTO DE ENFERMEDAD

detección del Ag p24	en fases precoces y tardias
detección de Ac anti-p24	en fases tardias
recuento clar de L.T4 o cociente respecto a L.T8

WESTR-BLOT ( WB)

RIPA

TECNICAS DE CRIBADO

prueba de aglutinación con látex o Htes

tecnicas de quimioluminiscencia

ELISA ( si es + se confirmar con otras técnicas):para detectar Ig G especifica contra VIH

tipos de ELISA:

indirectos	son más sensibles
competitivos	son más especificos
sandwich	son de tercera generación

TECNICAS DE CONFIRMACION

IFI

en una fase sólida se encuentran las clas infectadas por el VIH

se añade un Ac marcado o fijado a un fluorocromo ( para ver la reacción Ag-Ac)

se utiliza el microscopio de fluorescencia

RIPA: radioinmunoprecipitación

el virus se expone a una sustancia marcada

se detecta por autorradiografia los inmunoprecipitados q se han formado

el virus crece en las clas y se expone a una sustancia radiomarcada q tras el procesamiento permite detectar por autorradiografia los inmunoprecipitados q se han formado

la p24 se detecta peor

se utiliza para diferenciar o distinguir los Ac frente a las diferentes proteinas del virus

se somete las proteinas del virus a una electroforesis en gel de poliacrilamida ( se separan y forman unas bandas según su Pm ( las proteinas de bajo Pm emigran más lejos)

estas bandas ( las q contienen las fracciones de proteinas) reaccionan con el suero produciéndose la reacción Ag-Ac

luego se añade anti_Ig G humana marcada por una enzima

el wb demuestra la presencia de Ac frente a cada una de las proteinas del virus por separado

según la OMS: la presencia de al menos 2 bandas de envoltura demuestra la positividad del VIH ( VIH+)

las bandas más comunes son: en orden decreciente

gp160
gp120
p24

si con las pruebas de cribado y de confirmación la serologia es indeterminada entonces se hace el cultivo viral o PCR

CULTIVO

PCR

MARCADORES SEGUIMIENTO DE ENFERMEDAD

detección del Ag p24

en fases precoces y tardias

es el primer marcador serologico q positiviza después de la infección

puede reconocerse este Ag durante la primoinfección

detección de Ac anti-p24

en fases tardias

recuento clar de L.T4 o cociente respecto a L.T8

WESTR-BLOT ( WB)

RIPA

Virus: Características, Estructura y Clasificación

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