Sección de Citología

Estudio de las células sanguíneas y precursores desde el punto de vista estructural y funcional.

Sección de Hemostasia

Estudio de la coagulación sanguínea en hemostasia y trombosis.

Sección de Banco de Sangre y Hemoterapia

Estudio de compatibilidad de la sangre y componentes sanguíneos.

Eosinófilos

Tienen afinidad por colorantes ácidos como eosina. Procesos de alergias y parásitos.

Basófilos

Tienen afinidad por colorantes básicos, como azul de metileno. Procesos inflamatorios.

Neutrófilos

No tienen afinidad por ningún colorante. Procesos infecciosos.

El plasma: parte líquida de la sangre, de color amarillo translúcido donde flotan los elementos formes de la fase sólida de la sangre.

El suero: parte sin factores de coagulación y donde el fibrinógeno se transforma en fibrina, esta retrae los elementos formes provocando el coágulo, que se retrae y expulsa un líquido amarillo translúcido, denominado, suero.

Diferencia: el suero se diferencia del plasma porque no tiene ni factores de coagulación ni fibrinógeno.

A) Células pluripotentes

Son células que están en la médula ósea y son capaces de replicarse, proliferarse y diferenciarse en un tipo celular sanguíneo. Células madre mieloide y linfoide.

B) Células con capacidad de autorrenovarse

Las células madre.

C) Tipos de células formadas a partir de progenitores mieloides

Se forman los megacariocito, granulocitos, eritrocito, monocito…

D) ¿Las distintas células precursoras se pueden diferenciar por microscopía?

Sí, por sus características morfológicas y propiedades tintoriales.

A) Muestra en tubo con tapón azul

Usa citrato sódico del 3,8 % y se usa para hemostasia.

B) Muestra en tubo con tapón amarillo

Usa ácido cítrico + dextrosa o citrato + fosfato + dextrosa + adenina. Determina grupos sanguíneos.

C) Muestra en tubo con tapón lila

Usa EDTA tripotásico. Uso para inmunohematología, determinación morfológica de células sanguíneas y precursores, recuentos celulares…

D) Muestra en tubo con tapón negro

Usa citrato sódico del 3,8%. Determina VSG.

Hemograma: determinación citológica básica.

Eritropatología: estudia las anemias producidas por patologías intrínsecas de los hematíes.

Citomorfología: tinciones para estudiar la morfología de células sanguíneas y precursores en extensiones de sangre periférica, médula ósea y otros líquidos biológicos.

Citometría de flujo: caracterizar las células sanguíneas y sus precursores por la obtención de perfiles antigénicos.

A) Estudio de alteraciones de enzimas eritocitarias: Eritropatología.

B) Determinación de la fórmula leucocitaria: Hemograma.

C) Estudio de la hematopoyesis mediante la observación de la morfología de las células: Citomorfología.

D) Detección en los eritrocitos de antígenos relacionados con la hemoglobina paroxística nocturna: Entropatología.

El hemograma incluye el recuento de las 3 series, cuantificación de la hemoglobina, medida y cálculo de parámetros morfológicos de los hematíes, distribución porcentual de los tipos de leucocitos en sangre y la VSG.

Se usa en la hemostasia secundaria para estudiar la formación del coágulo de fibrina, molécula capaz de polimerizar formando una red 3D. Permite cuantificar la proporción de cada factor de coagulación y medir sustancias inhibidoras.

Inmunohematología: determina grupos sanguíneos, detecta anticuerpos irregulares y realiza pruebas de compatibilidad sanguínea.

Hemoterapia: obtención, almacenamiento y distribución de sangre y hemoderivados.

Validación técnica: evidencia de que el resultado obtenido encaja con los criterios de aceptación. Fase analítica.

Validación facultativa: que el proceso lo ha llevado personal cualificado, los resultados de estudio sean coherentes, que los informes cumplen los requisitos de forma y contenido. Fase postanalítica.

Parámetros cuantitativos para monitorizar los procesos, ya que dan información sobre su desarrollo y cumplimiento.

Documento de obligado conocimiento y cumplimiento por el personal de laboratorio.

Cabeza: Zona inicial y más gruesa, los hematíes pueden formar más de una capa y hay más proporción de linfocitos.

Cuerpo: zona media del frotis. Los hematíes se disponen formando 1 capa y los leucocitos mantienen una proporción equilibrada. Zona ideal para el estudio morfológico.

Cola: zona final de la extensión, es más fina. Los hematíes se disponen de forma acordonada dejando huecos entre ellos y hay mayor cantidad de leucocitos grandes y plaquetas. Forma redondeada con borde deshilachado.

Sangre periférica: por venopunción o punción de la yema del dedo con una lanceta.

Médula ósea: por aspirado de médula ósea.

• Portaobjetos: limpios y desengrasados. Las extensiones con porta sucios con polvo y partículas presentan rayas irregulares. Si además hay restos de grasa, aparecen agujeros en la extensión.

• Muestra de sangre: influyen en la calidad de la extensión el volumen de sangre y el anticoagulante de sangre.

• Ejecución de la técnica: aspectos de la ejecución de la técnica.

Tinción policromada

Tinción supravitales

A) Colorantes y afinidades

May Grünwald: solución eosina y azul de metanol, actúa como fijador. Con afinidad por los componentes celulares ácidos, como los ácidos nucleicos que se tiñen de azul.

B) Colores de tinción

Eritrocitos: rosa – salmón.

Granulos citoplasmáticos de los leucocitos eosinófilos: azul oscuro – negro.

C) Aplicación de los colorantes

Primero May Grünwald y luego Giemsa.

Las incubaciones se hacen por inmersión secuencial. Es necesario preparar 3 cubetas de tinción con los 3 reactivos y sumergir la extensión primero en la solución fijadora, luego en el colorante ácido tamponado y por último en la de colorante básico y tamponado.

La utilidad es la observación de células vivas. Los hematíes se tiñen de color verde pálido y los reticulocitos se diferencian porque en su interior se observan estructuras granulares y o filamentos de color azul.

La fosfatasa alcalina: enzima que hidroliza monoésteres de ácido fosfórico a pH alcalino. La tinción de fosfatasa alcalina granuloática o leucocitaria, detecta la actividad enzimática en los gránulos secundarios de los leucocitos neutrófilos. Permite calcular el índice de actividad FAG: se valoran los 100 neutrófilos y se asigna a cada uno un valor entre 0 y 4, según la intensidad del precipitado que se forme en el citoplasma de cada uno de ellos. La suma de las 100 puntuaciones es el índice de FAG, tiene un valor normal (20-100).

• Hemogramas que muestran desviación significativa en recuentos directos, indirectos o calculados.

• Sospecha clínica de una enfermedad hematológica.

• Sospecha clínica de una enfermedad no hematológica con manifestaciones hematológicas como enfermedades parasitarias o infecciosas, tratamientos oncológicos…

1. Contar los leucocitos en 10 campos de 40x de la zona.

2. Calcular la media de leucocitos por campo y multiplicar por 2000. Sirve para control de calidad para detectar discrepancias con el recuento automático.

A) Recuento diferencial de leucocitos

Implica el recuento de 100 leucocitos para expresar porcentualmente la proporción de los distintos tipos de leucocitos en la extensión y células inmaduras o blastos.

B) Detección y recuento de eritroblastos

El resultado cuantitativo se expresa como número de eritroblastos por cada 100 leucocitos.

C) Estimulación del recuento de plaquetas/mm3

Se cuentan las plaquetas en los campos donde los hematíes no se toquen. Se calcula el promedio por campo y se multiplican por 20000.

Aspirado: material de la médula ósea, con células hematopoyéticas y estromales, grasa y matriz extracelular en proporción variable según las circunstancias clínicas.

Sangre medular: de la vascularización de la médula, formada por red de vasos sanguíneos de pared fina, senos venosos. Por eso se habla también de sangre sinusal.