LABORATORIO1
Normas generales de uso en el laboratorio de microbiología:
- Ingresar con delantal blanco y limpio al laboratorio
- Está prohibido comer, fumar y beber en el laboratorio
- Antes de realizar una práctica se deberá estudiar los principios de esta, para tener una idea del objetivo, fundamento y técnica de lo que se hará
- Si se rompe un tubo o placa conteniendo un cultivo se debe comunicar inmediatamente al profesor encargado
- No tocar con manos o boca productos químicos
- Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos
Explique la importancia del proceso de esterilización en el laboratorio de microbiología: Si el material de laboratorio cuenta con los requerimientos de limpieza los experimentos son exitosos. Por el contrario, la presencia de bacterias, virus o microorganismos puede alterar las reacciones y modificar los resultados. Para evitar esto, es necesario aplicar algún método de esterilización al material de laboratorio. Uno de los métodos más utilizados es el uso de hornos de esterilización
Métodos de esterilización más importantes en el laboratorio
1) Calor seco: flameado, aire caliente. Se usa horno pasteur
2) Calor húmedo: ebullición, vapor fluente se usa un autoclave
Nombre la función de aparatos de uso frecuente en el laboratorio de microbiología:
- Mechero bunsen: esterilización al rojo vivo y flameado
- Microscopio óptico: observación de preparaciones
- Incubadora o estufa: crecimiento de cultivos en condiciones controladas de temperatura
- Autoclave: esterilización por calor húmedo
- Asa de siembra: sirve para sembrar muestras (trasladar inóculo)
LaboratorioN2
Clasificación de las bacterias según morfología:
-Espericas (cocos): que, según la agrupación característica de sus células se diferencian en:
- Staphylococcus y Micrococcus: grupos irregulares de células semejantes a racimo de uva
- Diplococcus: células agrupadas de a pares
- Streptococcus: células agrupadas formando cadenas cortas (2 – 6 células) y largas (10 – 20 células)
- Tetracoccus: células agrupadas de a 4 en un solo plano
- Sarcina: forman cubos de 8 células
Cilíndricas (bacilos o bastones): pueden presentarse como células aisladas en parejas (diplobacilos) o en cadenas (streptobacilos). Otras disposiciones pueden ser: en palizada (ej. Corynebacterium piphteriae y en grupos de a tres, semejando ramificaciones (ej. Mycobacterium tuberculosis)
Forma helicoidal (Spirillum): Generalmente de presentación aislada. Sin embargo, estas bacterias tienen notables diferencias en longitud y número de espiras según el género. Los organismos cortos y de espira incompleta se denominan bacteria común o vibriones
Describa el procedimiento de preparación de frotis fresco hasta su observación final y qué se observa: Frotis: consiste en un extendido de la muestra a estudiar, seguido de secado, fijación y eventualmente una coloración (para teñir)
Extendido: una gota de suspensión microbiana se deposita al centro de un portaobjeto, la manipulación se realiza asépticamente colocando la lámina cerca del mechero. En el caso de un cultivo sólido o de un producto semisólido, se deposita una pequeña gota de agua sobre el portaobjeto y con asa se muestrea una pequeña cantidad de producto que se emulsiona con la gota de agua. El emulsionado se extiende sobre la lámina ayudándose con un asa o pipeta Pasteur, para obtener un extendido delgado y homogéneo debe dejar un área de aproximadamente 1 a 2 cm2
Técnicas que permiten la observación de microorganismos in vivo:
- Observación en fresco entre portaobjetos y cubreobjetos
- Examen en fresco sobre gota pendiente en porta excavado
- Observación de preparaciones extendidas, fijadas y teñidas
Laboratorio n3: Tipos de tinción
1) Tinción simple: es la coloración de bacterias por la aplicación de una solución colorante simple en frotis ya fijado. El frotis se inunda con una solución de tinción durante un periodo específico de tiempo (30 seg. a 2 min.), luego se lava con agua y el portaobjeto se seca con papel secante. Tinción estructural: nos permite visualizar otras características de carácter estructural, como son la presencia de esporas, flagelos, cilios, cápsulas otros. Requiere fijación previa, utiliza al menos 2 colorantes. Las esporas son estructuras bacterianas que se forman en condiciones adversas por parte de ciertas bacterias. Tales esporas son capaces de resistir condiciones muy desfavorables, de ahí su denominación de resistencia
Tinción diferencial: permite diferenciar grupos microbianos o hacer coloraciones específicas. Ejemplo: la tinción de este tipo más extensamente usada es la tinción gram, pero también se utiliza tinción de ziel-neelsen, tinción de espiroquetas
Ventajas de utilizar preparaciones extendidas fijadas y teñidas: se pueden observar las características químicas de las bacterias. Se pueden clasificar según taxonomía y grupos de bacterias. Se pueden diferenciar entre gram positiva y negativa
Procedimiento para realizar preparaciones extendidas, fijadas y teñidas (ej. tinción de gram): suspender bacterias a examinar en líquido y extender una gota sobre un portaobjetos con ayuda de una asa de cultivo. Fijación: esta se realiza por medios químicos o físicos. Químicos: consisten en colocar el extendido en contacto con una sustancia química (ej. alcohol metílico, éter, etc.). Físicos: consisten en exponer el extendido al calor